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大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒说明书

发布时间:2017-05-31 20:07:51 分类:新闻动态 来源: 点击:

大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒说明书 大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒说明书 大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒说明书本试剂盒仅供研究使用。名称:通用名:大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)酶联免疫分析试剂盒使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相干液体样本中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。实验原理本试剂盒利用双抗体夹心法测定标本中大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。用纯化的大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中顺次加入肿瘤坏死因子α(TNF-α)再与HRP标记的羊抗鼠抗体结合,构成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过完全洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终究的黄色。色彩的深浅和样品中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)呈正相干。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算 大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒说明书本试剂盒仅供研究使用。名称:通用名:大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)酶联免疫分析试剂盒使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相干液体样本中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量砖瓦抗折实验机。实验原理本试剂盒利用双抗体夹心法测定标本中大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。用纯化的大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中顺次加入肿瘤坏死因子α(TNF-α)再与HRP标记的羊抗鼠抗体结合,构成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过完全洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终究的黄色。色彩的深浅和样品中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)呈正相干。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度。试剂盒组成120倍浓缩洗涤液30ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(360ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本收集后尽早进行提取,提取按相干文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行实验,可将标本放于⑵0℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第1、高温抗压实验机第2孔中分别加标准品100μl,然后在第1、第2孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第1孔、第2孔中各取100μl分别加到第3孔和第4孔,再在第3、第4孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第3孔和第4孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第5、第6孔中,再在第5、第6孔中分别灭火器爆破实验机加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第5、第6孔中各取50μl分别加到第7、第8孔中,再在第7、第8孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第7、第8孔中手袋振荡冲击实验机分别取50μl加到第9、第10孔中,再在第9第10孔分别避震器耐久实验机加标准品稀释液50μl,混匀后从第9第10孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为240ng/L,160ng/L,80ng/L,40ng/L,6自由度实验机 20ng/L)。2.加样:分别设空白孔(空白对比孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作点击划线寿命实验机相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终究稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板笔心漏墨实验机孔底部,尽可能不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:谨慎揭掉封板膜橡胶低温脆性实验机,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,车桥疲劳实验机终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序丈量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟之内进行。计算以标准物的浓度为手动冲击实验机横坐标,OD值为纵坐标,在座标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15⑶0分钟后方可以使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并常常校订其准确性,以免实验误差。传送带实验机1次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物资含量太高(样本OD值大于标准品孔第1孔的OD值),请先用样品稀释液稀释1定倍数(n倍)后再测定,计算办公众具实验机时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限1次性使用,以免交叉污染。6.底物请避光保高温持久蠕变实验机存。7.严格依照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按沾染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。检测范围:15ng/L ⑶00ng/L规格:96人份/盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2⑻℃。2.有效期:6个月厦门慧嘉生物科技有限公司专业代理众多国际生命科学领域的知名品牌。致力于各种 ELISA 试剂盒 、 1抗2抗 、细胞因子、生物试剂、移液器、耗材的销售推行及服务工作。
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